RNA高效保存液(RNAwait) 是一种无毒的可直接使用的样品储存液,能使细胞内的RNA与RNase分离,可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。组织获取后立即浸入RNAwait保存液中,在室温可以保存7天,4°C可以保存4周,-20°C、-80°C标本可以长期保存,RNA稳定存在不降解取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。

操作流程

1、根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量 应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×10⁷细胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原则是:量宁多勿少。

建议在实际操作中不要称量组织，而直接根据目测结果加入RNAwait量，以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块，体积为125mm³=125μl, 故应当加入1.25ml的RNAwait液。

2、将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;

3、快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，较小的组织直接取下，立即完全浸入RNAwait中。

注:组织的厚度一定要 <0.5cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0.5cm的任意片状后保存，较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官)则可以直接浸入RNAwait。

4、保存时先将样本浸入RNAwait后置4°C冰箱过夜(注: 4°C过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20°C冰箱(RNAwait在-20°C时仍为液态,如有结晶析出,也是正常情况);或者在4°C冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块,将组织块转移到-80°C冰箱。在RNAwait中保存的标本， 反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

注意事项

1、组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。

2、冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不 能有效渗入冰冻组织。

3、保存样品的RNA提取：样本从-20°C或-80°C冰箱取出后，复温到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait, 再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后续提取RNA的质量。

4、RNAwait在动物组织(如大鼠肝脏，脾脏)和细胞(如DH5a)RNA的保护中效果不错;植物材料种类繁多，没能一 一测试(烟草和拟南芥叶片中的RNA能被RNAwait有效保护)，建议预实验后再使用。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件

15-25°C,保质期2年。低温条件下有结晶析出时加热至37°C溶解后使用。