产品简介

本产品是新一代无蛋白快速封闭液，为多种聚合物的混合液，可快速填充固相支持物表面的空隙，减少非特异性信号的干扰；整体封闭效果明显优于传统的基于BSA（牛血清白蛋白）、脱脂奶粉、酪蛋白（Casein）等的封闭液；可用于Western Blot（WB）、ELISA、IHC、IF等实验中的封闭、一抗稀释。

快速高效：封闭时间5分钟即可，并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭剂相比，特异性信号更强。

背景低：本封闭液不含血清、白蛋白等蛋白质，确保了极高的信噪比。

兼容性好：本产品兼容辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶(AP)和生物素标记的二抗；不含影响HRP和AP活性的防腐剂；因不含生物素，故不会干扰基于生物素的检测。

使用便捷：本产品含TBST，可直接用于一抗的稀释。

操作步骤

1. Western Blot中膜的封闭

a) 完成转膜后用TBST洗涤1-2分钟 ；

b) 根据膜的大小，选取合适的容器，加入一定体积的无蛋白快速封闭液，确保封闭液能完全覆盖膜，置于钟摆或水平摇床上封闭5分钟（若出现高背景见问题三，延长封闭时间）；

c) 使用无蛋白快速封闭液稀释一抗，稀释倍数参考对应一抗使用说明书，制成一抗工作液；

d) 封闭完成后倒出无蛋白封闭液，TBST清洗10秒，加入一抗工作液进行后续孵育。

注意：一抗工作液务必完全覆盖PVDF或NC膜表面；无蛋白快速封闭液的主要功能是封闭PVDF或NC膜上未被蛋白质结合的位点，从而降低背景，WB曝光结果条带增多可能说明抗体本身识别了非特异性条带，可换用其他封闭液（牛奶或BSA）；

2. ELISA实验中基底的封闭

a) 使用抗原或抗体包被ELISA平板；

b) 每孔添加300 μL无蛋白快速封闭液，37℃孵育5分钟；

c) 按照ELISA实验要求，继续进行洗涤或甩板等后续步骤。

3. IHC和IF实验中的封闭

a) IHC和IF实验中使用本试剂作为溶剂溶解3%（质量体积比）的BSA，相较于PBS溶解的BSA，它在各组织中拥有稳定的封闭性能，优异的封闭效果；对于特异性好的抗体，可直接用本试剂作为封闭剂

b) 组织切片准备好之后加入无蛋白快速封闭液或者溶有BSA的无蛋白快速封闭液，室温静置30分钟（具有组织差异性）；一定要完全覆盖样本，避免样品干燥产生高背景

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；4℃保存，12个月有效，长期不用可-20℃保存。

注意事项

1. 没有任何一种封闭剂能适用于所有抗原和抗体检测系统。如出现本试剂不适合的抗体，请替换使用其他类型的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等。

2. 使用完毕后，将剩余溶液2-8℃保存，避免污染。

3. 本试剂具有一定黏度，移液枪吸取时需慢吸慢放以确保体积的准确性。

4. 本产品推荐仅使用一次，重复使用可能导致封闭效果下降；对于特异性好、信噪比高的抗体，本封闭液可以重复使用；回收的封闭液请勿与未使用过的封闭液混合使用。

5. 为了您的安全与健康，请穿实验服并带一次性手套操作