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JK-052

siRNA专用转染试剂

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    本公司生产的siRNA专用转染试剂是一款新型、性能稳定的siRNA专用转染试剂,它具有较强的压缩RNA的能力,能够把RNA高效率、迅速地转染到真核细胞之中,而不被核酸酶降解。与其他转染试剂相比,具有毒性低、稳定性好、耐血清能力强、转染简单易行、重复性好等优点。


    应用范围    

    该转染试剂可适用于众多原代培养和转化细胞株的siRNA转染。沉默效率高且性能稳定,在有无血清存在的细胞培养基中均能获得非常理想的基因沉默效果。

     

    使用方法                   

    siRNA转染

    以24孔板为例,请参考下表的转染规模调整,步骤如下:

    1、细胞接种: 每孔接种0.5-1.0×105个细胞,细胞培养12-24小时,使转染时细胞密度达到60-70%融合度。

    2、siRNA稀释: 将15pmol的siRNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL。

    3、转染试剂稀释: 取1μL的转染试剂加入到9μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL。

    4、复合物制备:将上述siRNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟。

    5、将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养18-48小时后检测转染效率,无需更换

    培养基。

                      

    siRNA转染的优化

    可通过改变细胞密度、siRNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,转染试剂 (µL):siRNA (pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。

     

               不同培养板所需转染试剂和siRNA的用量

    培养板

    单孔面积

    接种培养基

    Opti-MEM稀释后终体积

    siRNA转染

    试剂用量

    siRNA

    96孔板

    0.3cm2

    200µL

    10µL

    0.4µL

    7.5pmol

    24孔板

    2cm2

    500µL

    20µL

    1µL

    15pmol

    12孔板

    4cm2

    1mL

    40µL

    2µL

    30pmol

    6孔板

    10cm2

    2mL

    100µL

    4µL

    60pmol

    60mm培养皿

    20cm2

    5mL

    200µL

    8µL

    120pmol

    100mm培养皿

    60cm2

    15mL

    600µL

    24µL

    360pmol

     

     

    运输保存   

    常温运输,2-8℃可保存一年。

     

    注意事项   

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。