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JK-055

悬浮细胞专用转染试剂

1ml

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国产

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    本公司生产的悬浮细胞专用转染试剂是一款专用于悬浮细胞转染的DNA转染试剂,可用于质粒DNA在悬浮生长细胞中的传送。它适用于大规模蛋白生产,及工业化生产中的真核细胞转染。具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。


    应用范围  

    该转染试剂特别适用于293F和CHO-S等悬浮细胞的转染。在有血清和无血清的条件下,均可得到较高的转染效率, 且重复性好。在大规模蛋白生产中,操作简单、蛋白表达量高、细胞 毒性低、细胞通用性好。


    使用方法 

    质粒DNA的转染

    以100ml培养瓶为例,请参考下表的转染规模调整,步骤如下:

    1、细胞接种: 0.2-0.5×106/mL个细胞,接种于20mL培养基中,在37℃,120rpm,5%CO2 的条件下培养

    2、质粒DNA稀释: 将10µg质粒DNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL

    3、转染试剂稀释: 取20μL的转染试剂加入到30μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL

    4、复合物制备:将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟

    5、将上述100µL复合物加入到细胞培养瓶中,继续摇动培养,培养18-48小时后检测转染效率,无需更换培养基

                      

    质粒DNA的转染优化 

    可通过改变细胞密度、DNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。转染试剂 (µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。转染大于48h后,可通过适量添加培养基的方式延长转染时间。

     

               不同培养所需转染试剂和DNA的用量

    培养

    细胞数量

    接种培养基

    Opti-MEM稀释后终体积

    DNA转染

    试剂用量

    DNA

    50mL

    0.5×106/mL

    10mL

    50µL

    10µL

    5µg

    100mL

    0.5×106/mL

    20mL

    100µL

    20µL

    10µg

    250mL

    0.5×106/mL

    50mL

    200µL

    50µL

    25µg

    500mL

    0.5×106/mL

    100mL

    400µL

    100µL

    50µg

    1L

    0.5×106/mL

    200mL

    2mL

    200µL

    100µg

    5L

    0.5×106/mL

    1L

    4mL

    1mL

    500µg

     

     

    运输保存  

    常温运输,2-8℃可保存一年。

     

    注意事项 

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。