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JK-372

外泌体提取试剂盒(尿液)

50ml

1800

1650

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  • 产品简介

    外泌体(Exosome)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构,存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。外泌体被认为是特定细胞间效应物及信号大分子传递的信使,然而,人们对外泌体的形成,组成成分及所参与的生物学过程仍不完全清楚。对外泌体功能及转运机制进行生物学研究,需要研究者首先能够分离、提取出完整的外泌体, 但目前所使用的提取方法复杂繁琐, 且特异性不高。

    外泌体提取试剂(尿液)提供了一种从尿液样品中浓缩、分离完整外泌体的简单且可靠的方法。通过试剂中的亲水性基团锁住样品中的水分子,迫使外泌体从尿液样品中分离出来,然后通过短暂低速离心来收集总外泌体。

     

    使用方法(仅供参考)

    1.从冰箱中取出尿液样品,若尿液样品为冰冻态,于25 ~ 37℃水浴解冻至完全成为液态,并置于冰上。

    2.4℃,3000xg离心15分钟以去除尿液样品中的细胞及碎片。

    3.取上清转移至新的洁净EP 管中,并及时置于冰上。切记不要搅动样品中的团状沉淀物。

    4.向步骤3中收集的尿液样品中加入等体积的外泌体提取试剂。(如:1 mL尿液样品+ 1 mL 外泌体提取试剂)。

    5.轻摇或涡旋混匀尿液样品/外泌体提取试剂混合物,直至成为均质溶液。室温孵育60分钟。

    6.4℃,10000xg离心60分钟。

    7.吸弃上清液,EP 管底部的米色或白色沉淀物即含有外泌体(大部分情况下肉眼不可见);亦可再以10000xg离心5分钟,以收集管壁残留液体作进一步优化,用移液枪小心吸弃残留液体。

    8.用适量PBS缓冲液或同类缓冲液重悬沉淀物(如:800uL尿液样品所得外泌体沉淀物,重悬体积为:20-50 µL;5mL尿液样品所得外泌体沉淀物,重悬体积为:100-300 µL)。

    9.沉淀物被重悬后,所获得的总外泌体即可用于下游分析鉴定实验,或进一步纯化总外泌体。分离提取获得的总外泌体可于4℃保存长达1周,-20℃长期保存。

     

    保存条件

     

    4℃保存,一年有效。

     

    注意事项

    1、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

    2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。