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产品简介
本非变性PAGE凝胶制备试剂盒包含非变性凝胶制备所需的全部试剂。本试剂盒可配制30-50块常规大小的非变性PAGE胶。
由于采用非连续Laemmli凝胶系统（Tris-Glycine系统），分离胶pH为8.8，因此要求待分离的蛋白等电点pI＜7.0，这样蛋白在凝胶系统内带负电荷，在凝胶电泳中才能正常向正极泳动。
使用方法
一、配制10% APS-5ml
将0.5g APS干粉溶于5ml超纯水中，彻底溶解后分装，1ml/支，-20℃备存，每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间，以防失效。10%APS在4℃有效期为一周，-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20℃保存的10% APS。
二、配制分离胶
1、根据表一，将不同体积的成分在小烧杯中混合；先后加入TEMED和10%APS，轻轻搅拌混匀，避免产生气泡。
2、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液（对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可），然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层，使凝胶表面保持平整。
3、静置15-20分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，说明凝胶已聚合。
三、配制浓缩胶
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、根据表一，将不同成分在一个小烧杯中混合；先后加入TEMED和10%APS，轻轻搅拌混匀，避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
5、静置30-60分钟，等待浓缩胶聚合。
表一 配制不同浓度1mm厚度凝胶所需各组分的体积
凝胶浓度
各组分体积
组分
4%浓缩胶
分离胶
6%
8%
10%
12%
15%
超纯水
1.23ml
2.7ml
2.4ml
2ml
1.7ml
1.2ml
30% PAA（29:1）
0.27ml
1ml
1.3ml
1.7ml
2ml
2.5ml
4×浓缩胶缓冲液
0.5ml
-
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-
-
-
4×分离胶缓冲液
-
1.25ml
1.25ml
1.25ml
1.25ml
1.25ml 10%APS 20ul 50ul 50ul 50ul 50ul 50ul TEMED 2ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 总体积 2ml 5ml 5ml 5ml 5ml 5ml 保存条件
按照标签温度保存，有效期一年。
注意事项
1、凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚合时间会延长。可以根据环境温
度的不同调节APS的加入量。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。