产品中心

产品货号

产品名称

规格

销售价

会员价

货期

产地

订购

JK-500

DNA退火缓冲液(5X)

1ml

50

50

现货

国产

  • 产品简介
  • 使用说明
  • 相关产品
  • 参考文献
  • 购买咨询
  • 产品简介

    DNA退火缓冲液即DNA寡核苷酸退火缓冲液,是一种可用于DNA oligo退火的缓冲液,可用于常规的DNA oligo的退火,尤其适合于较难退火的用于RNAi(也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。该缓冲液能有效避免DNA oligo自身形成发夹结构,并且两条oligo退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接,转化后可以得到大量的阳性克隆。

    本试剂操作简单,只需把待退火的DNA oligo和退火缓冲液按照一定比例混合后,置于PCR仪上进行程序降温,约90min即可完成。

     

    使用方法(仅供参考)

    1. 把待退火的DNA oligo用无酶水配制成50uM,同时彻底溶解退火缓冲液(5×)备用。

     

    2. 按如下反应体系操作

    步骤

    组份

    体积

    1

    无酶水

    40μl

    2

    退火缓冲液(5×)

    20μl

    3

    DNA oligo A (50μM)

    20μl

    4

    DNA oligo B (50μM)

    20μl


    Total

    100μl

    按照上述步骤,依次加入对应溶液并混匀,如果使用的PCR仪没有热盖设定,可加入Mineral Oil(矿物油)防止在后续反应中液体挥发,一般5-10ul即可。

     

    3. 按如下设定PCR程序,进行退火:

    步骤

    温度

    时间

    作用

    1

    95℃

    2min

    Oligo充分变性

    2

    每90s下降1℃,降至25℃

    约90min

    程序退火

    3

    4℃

    -

    保存

    注:如果使用的PCR仪无法设定梯度降温功能,也可以选择在经过95℃,2min后,把管子拿出,自然冷却至室温。

     

    4. 反应结束后产物可以直接用于后续实验,如需保存请放于-20℃。

     

    保存条件

     

    -20℃保存,有效期1年。

     

    注意事项

    1、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

    2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。