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JK-501

RNA退火缓冲液(5X)

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  • 产品简介

    RNA退火缓冲液即RNA寡核苷酸退火缓冲液,是一种可用于RNA oligo退火的缓冲液。用于siRNA而合成的互补的RNA oligo可以用该退火缓冲液进行退火,以形成双链RNA。

    本试剂操作简单,只需把待退火的RNA oligo和退火缓冲液按照一定比例混合后,置于PCR仪上进行程序降温,约60min即可完成。

     

    使用方法(仅供参考)

    1. 把待退火的RNA oligo用无酶水(例如:BL510A)配制成200uM,同时彻底溶解退火缓冲液(5×)备用。

    2. 按如下反应体系操作

    步骤

    组份

    体积

    1

    无酶水

    30μl

    2

    退火缓冲液(5×)

    20μl

    3

    RNA   oligo A (200μM)

    25μl

    4

    RNA   oligo B (200μM)

    25μl


    Total

    100μl

    按照上述步骤,依次加入对应溶液并混匀,如果使用的PCR仪没有热盖设定,可加入Mineral Oil(矿物油)防止在后续反应中液体挥发,一般5-10ul即可。

    3. 按如下设定PCR程序,进行退火

    步骤

    温度

    时间

    作用

    1

    90℃

    1min

    Oligo充分变性

    2

    每5s下降0.1℃,降至25℃

    约60min

    程序退火

    3

    -20℃

    -

    保存

    注:如果使用的PCR仪无法设定梯度降温功能,也可以选择在经过90℃,1min后,把管子拿出,自然冷却至室温。

    4. 反应结束后产物可以直接用于后续实验,如需保存请放于-20℃。

     

    保存条件

     

    -20℃保存,有效期1年。

     

    注意事项

    1、  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

    2、  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。