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产品简介
RNA退火缓冲液即RNA寡核苷酸退火缓冲液,是一种可用于RNA oligo退火的缓冲液。用于siRNA而合成的互补的RNA oligo可以用该退火缓冲液进行退火,以形成双链RNA。
本试剂操作简单,只需把待退火的RNA oligo和退火缓冲液按照一定比例混合后,置于PCR仪上进行程序降温,约60min即可完成。
使用方法(仅供参考)
1. 把待退火的RNA oligo用无酶水(例如:BL510A)配制成200uM,同时彻底溶解退火缓冲液(5×)备用。
2. 按如下反应体系操作
步骤
组份
体积
1
无酶水
30μl
2
退火缓冲液(5×)
20μl
3
RNA oligo A (200μM)
25μl
4
RNA oligo B (200μM)
25μl
Total
100μl
按照上述步骤,依次加入对应溶液并混匀,如果使用的PCR仪没有热盖设定,可加入Mineral Oil(矿物油)防止在后续反应中液体挥发,一般5-10ul即可。
3. 按如下设定PCR程序,进行退火
步骤
温度
时间
作用
1
90℃
1min
Oligo充分变性
2
每5s下降0.1℃,降至25℃
约60min
程序退火
3
-20℃
-
保存
注:如果使用的PCR仪无法设定梯度降温功能,也可以选择在经过90℃,1min后,把管子拿出,自然冷却至室温。
4. 反应结束后产物可以直接用于后续实验,如需保存请放于-20℃。
保存条件
-20℃保存,有效期1年。
注意事项
1、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

