产品简介

本试剂盒用于从培养细菌中提取蛋白，其中的裂解缓冲液含有蛋白酶抑制剂，作用温和，提取过程简便高效。获得的蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究。

产品组分

使用方法（仅供参考）

1、菌液离心收集菌体后，用PBS将菌沉淀重悬洗涤2～3次；

2、Lysis工作液配制：1ml冷Lysis Buffer加1µl蛋白酶抑制剂、1µl DTT和10µl PMSF混匀，冰上保存待用；

3、按原菌液体积1/5～1/10加入Lysis工作液重悬菌体，4℃孵育10min；冰浴超声（超声条件可参考：300w，超声10s，停止10s，共20min，至超声完全，具体可视实际情况而定）；如无超声条件可反复冻融3次；

注意：判断是否超声完全方法：（1）外观判断：超声前菌悬液浑浊，超声完全后变得透明、清澈。（2）液体的粘滞性：超声后菌液从枪头滴下不粘连。（3）高速离心（一般用6,000g 10min），沉淀是未破碎或破碎不完全的菌体。（4）染色：破碎后的菌液涂片，革兰氏结晶紫溶液染色0.5min，镜检。

4、4℃，14000rpm离心10min，收集上清为蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5、蛋白提取物分装保存于-70℃，避免反复冻融。

保存条件

-20℃保存，1年有效。

注意事项

1、所有接触样品的用具及试剂均需预冷。

2、提取蛋白后，如有必要，可透析除去表面活性剂。

3、如果超声时出现黑色沉淀，说明超声功率太强。

4、超声时间太长、功率太高对蛋白活性会有影响。

5、超声时尽量防止泡沫的产生。

6、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。