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产品简介
本试剂盒用于从培养酵母中提取蛋白,其中的裂解缓冲液含有蛋白酶抑制剂,作用温和,提取过程简便高效。获得的蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究。
产品组分
产品编号
产品名称
规格
保存条件
JK-547-1
Buffer A
50ml
2-8℃
JK-547-2
Lysis Buffer
50ml
2-8℃
JK-547-3
蛋白酶抑制剂
50µl
-20℃
JK-547-4
DTT(1M)
0.5ml
-20℃,避光
JK-547-5
PMSF(100mM)
0.5ml
-20℃
使用方法(仅供参考)
1、Buffer A工作液配制:使用前1ml Buffer A中加入2µl β-巯基乙醇。
2、Lysis Buffer工作液配制:1ml冷Lysis Buffer加1µl蛋白酶抑制剂、10µl DTT和10µl PMSF,混匀。冰上保存待用。
3、菌液离心收集菌体后,用PBS将菌沉淀重悬洗涤2~3次;
4、按原菌液体积1/5~1/10加入Buffer A工作液重悬菌体(或加入5倍于细胞沉淀体积Buffer A工作液),37℃孵育30min,期间不时轻摇混匀;
5、5000rpm离心5min,弃上清;
6、沉淀中加入与Buffer A工作液等体积的Lysis Buffer工作液,4℃孵育30min,期间涡旋混匀3次;
7、4℃,14000rpm离心10min,收集上清为蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
8、分装保存于-70℃,避免反复冻融。
保存条件
-20℃保存,1年有效。
注意事项
1、所有接触样品的用具及试剂均需预冷。
2、提取蛋白后,如有必要,可透析除去表面活性剂。
3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

