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JK-670

DEAE纤维素DE-52

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    DEAE 纤维素 DE-52,一种柱色谱使用的弱碱性阴离子交换纤维素。不溶于水、酸、碱和乙醇。采用平均粒径为 50µm 的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。
    别名:DEAE 纤维素 52;离子交换纤维素;DEAE 纤维素 DE52
    CAS:9013-34-7
    外观(性状):预溶胀微粒,白色
    凝胶类型:纤维素凝胶,离子交换型
    结构成分:高度交联纤维素
    粒径:50um
    配基密度:40umol/ml
    吸附载量:180mg HSA/ml
     
    应用
    DEAE-纤维素,它采用平均粒径为 50 um 的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,它在高流水下保持更高载量,同时又具有更好的分辨率,用于分离生物高分子。
     
    使用方法
    1 色谱柱装填
    1、所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。填料可直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可,如果不好溶胀,可适当加热。
    2、在柱子下端加入 20%乙醇,以除去柱子中的空气,关闭柱子出口,在柱内保留少量的 20%乙醇。20%乙醇容易产生气泡,可以在里面加 1%吐温避免气泡产生。也可以换成纯水装柱子,但是需要把填料中的 20%乙醇也换成纯水,具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行,也可以小心倾去填料上的 20%乙醇,再换成 5 倍体积的纯水,反复沉淀去上清,5 次左右就可以用于装柱子。
    3、此填料颗粒比较细,所以一定要注意柱子要选择合适的筛网,也可以取点填料加到筛网上试试,如果没有问题再将填料连续倒入柱子时,要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流,以减少气泡的产生,让填料先自然沉降到填料体积不再变化,而填料和上面的液体很好分层,上层溶液完全澄清,就可以开泵用适当的流速压柱子,填料体积不再变化后,再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于装柱子的流速。
    4、在装柱子前,填料从冰箱中取出至少要室温放置 2-3 个小时,这样避免装柱子时由于温度变化而使柱子中产生气泡。
    2 蛋白的结合
    样品的盐浓度和 pH 要尽量和平衡柱子的缓冲液一致,盐浓度过高或者 pH 太低也许挂不上,所以要根据自己的样品做适当调整。
    3 蛋白的洗脱
    填料如果采用线性梯度洗脱,柱子的直径和高度比最好是大于 10,数值越大越有利于分离,而且样品最好别上太多,可以按约 10mg/ml 上样,如果采用阶段洗脱的方法,装短粗柱子就可以,上样量也没有限制。阶段洗脱容易放大,重复性好,如果洗脱条件好完全可以得到和线性梯度一样或者更好。
    4 再生清洗
    1、每次用完最好用 0.1M NaOH 含 2M NaCl 洗 5 个柱床体积,再用水洗 5 个柱床体积,然后用 20%乙醇保存,使用 3-5 次后在水洗之后再用 70%的乙醇或 30%异丙醇(含1%吐温)洗 5 个柱床体积,最后 20%的乙醇流洗 5 个柱床体积。
    2、有机溶剂和水混合很容易产生气泡,为了避免这样情况,可以将配好的有机溶剂在室温放置过夜,再使用,这样可以避免气泡进柱子而导致柱子不能正常使用。
     
    有效期
    4℃,密封保存1年
     
    注意事项
    1. 将本品置于通风、干燥的地方保存,不能冷冻。
    2. 在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。
    3. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
    4. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。