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产品简介
基底膜六胺银染色又叫PASM染色(PeriodicAcid-SilverMethenamine)是一种经典显示基底膜黏多糖的方法,组织经过碘酸氧化,使基底膜内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银,氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金,同时使背景更清晰,海波可以固定并洗去未还原的银离子。
基底膜六胺银染色液(PASM)能清晰地显示基底膜,在肾病变中应用最多,常用来观察肾小球毛细血管基底膜在炎性损伤如断裂、增生、折叠等变化的形态改变。
产品组成
产品名称
规格
保存条件
试剂A:过碘酸溶液
50ml
4℃避光
试剂B:铁明矾溶液
50ml
室温
试剂C1:银溶液
1.5ml
4℃避光
试剂C2:六胺溶液
25ml
4℃避光
试剂C3:硼砂溶液
25ml
室温
试剂D:氯化金溶液
50ml
4℃避光
试剂E:海波溶液
50ml
室温
试剂F:淡绿溶液
50ml
室温
需自备材料
蒸馏水、系列乙醇、二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液、中性树胶、水浴锅或水浴箱。
操作步骤(仅供参考):
1、常规切片二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液脱蜡至水。
2、切片入过碘酸溶液氧化15min,自来水洗、蒸馏水洗2min。
3、入铁明矾溶液染色10min,自来水洗,蒸馏水洗2min。
4、配制六胺银贮备液:银溶液:六胺溶液=6:100混合即成,会有少量沉淀产生,充分溶解即可;可4℃保存,3个月有效。
5、配制六胺银工作液:六胺银贮备液:硼砂溶液=106:100混合,六胺银工作液是一次性的,不能久放,配制后可放入60℃温箱中预热30min,再放人切片进行染色。
6、切片放入预热好的六胺银工作液,60℃水浴染色大约25-30min,切片呈烟草黄色或黑色为止,入蒸馏水中清洗。
7、用氯化金溶液调色1-2min,蒸馏水洗2min,入海波溶液处理1min,自来水洗。
8、用淡绿溶液复染1min,自来水洗,95%乙醇快速脱水,二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液透明,中性树胶封固。
染色结果
肾小球囊基底膜、肾毛细血管球基底膜呈黑色,背景呈绿色。
保质期:6个月;低温运输,4℃保存。
注意事项
1、实验中所用玻璃器皿,应预先放入洗液(如无洗液,可用0.1M盐酸浸泡,清洗干净)浸泡过并冲洗干净,烤干。
2、六胺银储备液可4℃保存,3个月有效。
3、六胺银工作液是一次性的,不能久放。
4、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
5、氯化金调色时一定要在显微镜下观察,实时看其颜色变化。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

