产品描述

金担子素A（Aureobasidin A，AbA），也称为短梗霉素A，一种来源于丝状真菌Aureobasidium pullulansNo. R106的环酯肽类抗真菌抗生素，在较低浓度（0.1-0.5μg/ml）下即可对酵母菌产生毒性，对该抗生素敏感的真菌包括：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、构巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillusniger.）。金担子素AbA通过抑制真菌生长所依赖的肌醇磷脂酰神经酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻碍神经酰胺到肌醇磷脂酰神经酰胺的合成，导致鞘脂类物质的合成量不足，细胞膜破裂，进而杀死菌株。研究发现，来自酿酒酵母菌的AUR1和构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性，都能够编码IPC合成酶，对这两种基因的点突变，也都赋予菌株对AbA产生很强的抗性，比如：突变基因AUR1-C。

酵母转化研究中，金担子素A（AbA）是一种非常有效的选择性标志，使用上基本不需优化条件，且创造极低背景。AbA抗性是酵母双杂交研究中理想的报告子，兼容于携带相应抗性的酵母单杂交/双杂交系统，并提供良好的筛选结果。

我司提供两种形式的本品，一种以溶于甲醇的储存液形式提供，浓度1mg/ml，且规格小，适合需量较少用户，经济实惠；一种以冻干粉形式提供，运输方便且稳定性相对较高，适合需量多的用户。AbA常用筛选浓度为100-200ng/ml，具体的筛选浓度取决于宿主细胞的敏感度【见附表1】。

产品特性

1、同义名：短梗霉素A

2、分子式：C60H92N8O11

3、分子量：1100Da

4、纯度：≥95%

5、熔点：155-157℃

6、溶解性：粉末不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）

7、化学结构式： 

使用方法

1）对于金担子素A（1 mg/ml）储存液：直接用酵母培养基稀释到所需的筛选浓度，常用的筛选浓度为100-200ng/ml，具体的筛选浓度受宿主细胞的敏感度影响。

2）对于金担子素A粉末：用无水乙醇或甲醇将粉末会从分溶解配制成0.5-5mg/ml储存液，2-8℃保存。实验前，用酵母培养基稀释到所需筛选浓度即可。

应用示例（来自文献资源）

A.酵母单杂系统Y1Hgold：

文献①:The screening and functional study of proteins binding with the BmNPV polyhedrin promoter.PMID: 22559085

用量：用来抑制Y1HGold (p53-AbAi)酵母菌株基础表达的AbA最低浓度为200ng/ml；用来抑制Y1HGold (p3rep-AbAi)和Y1HGold (p3mut-AbAi])酵母菌株基础表达的AbA最低浓度为300ng/ml。

文献②:BjMYB1, a transcription factor implicated in plant defence through activating BjCHI1 chitinase expression by binding to a W-box-like element. PMID: 27353280

用量：为了开展Y1H筛选，用来抑制Y1Hgold [pBait-AbAi]和Y1Hgold [pBait-m-AbAi]酵母菌生长的AbA最低抑制浓度在SD/−Ura/+AbA培养基上首先确认后为550ng/ml。

文献③：Two Types of Etiological Mutation in the Limb-Specific Enhancer of Shh.PMID: 28710291

用量：第一次筛选，cDNA和线性pGADT7载体共转化进入Y1HGold [Hx-pAbAi]，转化子涂布在含200ng/ml AbA的SD-Leu培养基。

B.酵母双杂系统Y2Hgold：

文献①:PbTTG1 forms a ribonucleoprotein complex with polypyrimidine tract-binding protein PbPTB3 to facilitate the long-distance trafficking of PbWoxT1 mRNA. PMID: 30824022

用量：简言之，转化进pGBKT7-PbPTB3的Y2HGold用作诱饵来筛选含pGADT7载体的Y187（含cDNA文库）转化子。两者在30℃接合24h，在含X-α-Gal和300ng/ml AbA的DDO (SD/-Leu/-Trp)培养基筛选3-5天。

保存与运输方法

保存：冻干粉室温保存，至少1年有效；储存液（1mg/ml）置于2-8℃保存，至少6个月有效。

运输：冻干粉室温运输，储存液（1mg/ml）冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附表1 金担子素（Aureobasidin, AbA）对不同酵母菌的最低抑菌浓度