产品介绍
本公司生产的通用型基因转染试剂是一款高性能、高品质的通用型基因转染试剂,既可用于传送质粒DNA,又具有较强的RNA转染能力。与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围
该转染试剂可适用于各种较难转染细胞株的质粒DNA或siRNA的转染。适用于多种贴壁细胞,特别适用于各种较难转细胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
使用方法
质粒DNA的转染
以24孔板为例,请参考下表的转染规模调整,步骤如下:
1、细胞接种: 每孔接种0.5-1.0×105个细胞,细胞培养12-24小时,使转染时细胞密度达到60-70%融合度
2、DNA/siRNA稀释: 将0.5µg质粒DNA或15pmol siRNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL
3、转染试剂稀释: 取1μL的转染试剂加入到9μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL
4、复合物制备:将上述质粒DNA或siRNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10
5、将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养18-48小时后检测转染效率,无需更换
siRNA的转染
转染步骤与DNA相同,请参考下表的转染规模进行调整,所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。
质粒DNA和siRNA的转染优化
可通过改变细胞密度、DNA或siRNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,转染试剂 (µL):DNA (µg)可以在1:1至5:1之间调整,转染试剂 (µL):siRNA ((pmol))可以在0.02:1至0.15:1之间调整
不同培养板所需转染试剂和DNA的用量
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培养板 |
单孔面积 |
接种培养基 |
Opti-MEM稀释后终体积 |
DNA转染 |
siRNA转染 |
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试剂用量 |
DNA |
试剂用量 |
siRNA |
||||
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96孔板 |
0.3cm2 |
200µL |
10µL |
0.4µL |
0.2µg |
0.5µL |
7.5pmol |
|
24孔板 |
2cm2 |
500µL |
20µL |
1µL |
0.5µg |
1µL |
15pmol |
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12孔板 |
4cm2 |
1mL |
40µL |
2µL |
1µg |
2µL |
30pmol |
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6孔板 |
10cm2 |
2mL |
100µL |
4µL |
2µg |
4µL |
60pmol |
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60mm培养皿 |
20cm2 |
5mL |
200µL |
8µL |
4µg |
8µL |
120pmol |
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100mm培养皿 |
60cm2 |
15mL |
600µL |
24µL |
12µg |
24µL |
360pmol |
运输保存
常温运输,2-8℃可保存一年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

