产品介绍
本公司生产的siRNA专用转染试剂是一款新型、性能稳定的siRNA专用转染试剂,它具有较强的压缩RNA的能力,能够把RNA高效率、迅速地转染到真核细胞之中,而不被核酸酶降解。与其他转染试剂相比,具有毒性低、稳定性好、耐血清能力强、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围
该转染试剂可适用于众多原代培养和转化细胞株的siRNA转染。沉默效率高且性能稳定,在有无血清存在的细胞培养基中均能获得非常理想的基因沉默效果。
使用方法
siRNA转染
以24孔板为例,请参考下表的转染规模调整,步骤如下:
1、细胞接种: 每孔接种0.5-1.0×105个细胞,细胞培养12-24小时,使转染时细胞密度达到60-70%融合度。
2、siRNA稀释: 将15pmol的siRNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL。
3、转染试剂稀释: 取1μL的转染试剂加入到9μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL。
4、复合物制备:将上述siRNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟。
5、将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养18-48小时后检测转染效率,无需更换
培养基。
siRNA转染的优化
可通过改变细胞密度、siRNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,转染试剂 (µL):siRNA (pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。
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培养板 |
单孔面积 |
接种培养基 |
Opti-MEM稀释后终体积 |
siRNA转染 |
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试剂用量 |
siRNA |
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96孔板 |
0.3cm2 |
200µL |
10µL |
0.4µL |
7.5pmol |
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24孔板 |
2cm2 |
500µL |
20µL |
1µL |
15pmol |
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12孔板 |
4cm2 |
1mL |
40µL |
2µL |
30pmol |
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6孔板 |
10cm2 |
2mL |
100µL |
4µL |
60pmol |
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60mm培养皿 |
20cm2 |
5mL |
200µL |
8µL |
120pmol |
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100mm培养皿 |
60cm2 |
15mL |
600µL |
24µL |
360pmol |
运输保存
常温运输,2-8℃可保存一年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

