产品介绍
本公司生产的体内DNA及siRNA专用转染试剂是一款体内专用型基因转染试剂,可通过尾静脉注射的方式将基因传送至肿瘤部位。与其它体内转染试剂相比,具有操作简便、体内毒性低、稳定性好、体内循环时间长、靶向性好等优点。
应用范围
该转染试剂可适用于众多动物肿瘤模型。可携带荧光标记基因、治疗基因等到达肿瘤部位,并在肿瘤部位蓄积和表达。特别适用于各种常规肿瘤模型如HeLa、B16F10、MCF-7、 MDA-MB-231和A549等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
使用方法
体内转染方法
以体重为20g的荷瘤鼠为例,请参考下表的转染规模调整,步骤如下:
1、试剂准备: 按照下表用量首先取20µL转染试剂放置于样品管中。
2、复合物制备: 取40µL的质粒DNA(DNA浓度为0.5µg/µL) 或siRNA(1.5nmol)与上述转染试剂进行复合。
3、室温静置20分钟。
4、补加葡萄糖注射液: 取140µL的葡萄糖注射液加入到上述复合物溶液中。
5、通过尾静脉注射的方式,注射于鼠体内,24-48小时后检测基因在肿瘤部位的蓄积或表达。
体内转染条件的优化
可通过改变肿瘤体积的大小、 基因的用量和浓度以及转染试剂浓度对体内转染进行优化。保证肿瘤体积在50mm3~200mm3最佳,转染试剂 (µL): DNA(µg)可以在2:1和0.5:1之间调整;转染试剂(µL): siRNA(nmol)可以在10:1和20:1之间调整。根据小鼠体重的不同,葡萄糖注射液的补加体积可以在推荐量±30µL之间调节。瘤内基因蓄积建议在注射后24小时检测,瘤内基因表达建议在注射后48小时检测。
不同体重鼠的体内转染试剂的用量
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鼠体重 |
建议瘤体积 |
葡萄糖注射液 稀释后终体积 |
DNA推荐用量 |
siRNA推荐用量 |
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试剂用量 |
DNA |
试剂用量 |
siRNA |
|||
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15g |
100mm3 |
150µL |
15µL |
15µg |
15µL |
1.2nmol |
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20g |
100mm3 |
200µL |
20µL |
20µg |
20µL |
1.5nmol |
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25g |
100mm3 |
250µL |
25µL |
25µg |
25µL |
2.0nmol |
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30g |
100mm3 |
300µL |
30µL |
30µg |
30µL |
2.4nmol |
运输保存
常温运输,2-8℃可保存一年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

