产品介绍
本公司生产的悬浮细胞专用转染试剂是一款专用于悬浮细胞转染的DNA转染试剂,可用于质粒DNA在悬浮生长细胞中的传送。它适用于大规模蛋白生产,及工业化生产中的真核细胞转染。具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围
该转染试剂特别适用于293F和CHO-S等悬浮细胞的转染。在有血清和无血清的条件下,均可得到较高的转染效率, 且重复性好。在大规模蛋白生产中,操作简单、蛋白表达量高、细胞 毒性低、细胞通用性好。
使用方法
质粒DNA的转染
以100ml培养瓶为例,请参考下表的转染规模调整,步骤如下:
1、细胞接种: 0.2-0.5×106/mL个细胞,接种于20mL培养基中,在37℃,120rpm,5%CO2 的条件下培养
2、质粒DNA稀释: 将10µg质粒DNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL
3、转染试剂稀释: 取20μL的转染试剂加入到30μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL
4、复合物制备:将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟
5、将上述100µL复合物加入到细胞培养瓶中,继续摇动培养,培养18-48小时后检测转染效率,无需更换培养基
质粒DNA的转染优化
可通过改变细胞密度、DNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。转染试剂 (µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。转染大于48h后,可通过适量添加培养基的方式延长转染时间。
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培养瓶 |
细胞数量 |
接种培养基 |
Opti-MEM稀释后终体积 |
DNA转染 |
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试剂用量 |
DNA |
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50mL |
0.5×106/mL |
10mL |
50µL |
10µL |
5µg |
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100mL |
0.5×106/mL |
20mL |
100µL |
20µL |
10µg |
|
250mL |
0.5×106/mL |
50mL |
200µL |
50µL |
25µg |
|
500mL |
0.5×106/mL |
100mL |
400µL |
100µL |
50µg |
|
1L |
0.5×106/mL |
200mL |
2mL |
200µL |
100µg |
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5L |
0.5×106/mL |
1L |
4mL |
1mL |
500µg |
运输保存
常温运输,2-8℃可保存一年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

