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悬浮细胞专用转染试剂

发布日期:2025-04-18    浏览次数:147

产品介绍    

本公司生产的悬浮细胞专用转染试剂是一款专用于悬浮细胞转染的DNA转染试剂,可用于质粒DNA在悬浮生长细胞中的传送。它适用于大规模蛋白生产,及工业化生产中的真核细胞转染。具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。


应用范围  

该转染试剂特别适用于293F和CHO-S等悬浮细胞的转染。在有血清和无血清的条件下,均可得到较高的转染效率, 且重复性好。在大规模蛋白生产中,操作简单、蛋白表达量高、细胞 毒性低、细胞通用性好。


使用方法 

质粒DNA的转染

以100ml培养瓶为例,请参考下表的转染规模调整,步骤如下:

1、细胞接种: 0.2-0.5×106/mL个细胞,接种于20mL培养基中,在37℃,120rpm,5%CO2 的条件下培养

2、质粒DNA稀释: 将10µg质粒DNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL

3、转染试剂稀释: 取20μL的转染试剂加入到30μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL

4、复合物制备:将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟

5、将上述100µL复合物加入到细胞培养瓶中,继续摇动培养,培养18-48小时后检测转染效率,无需更换培养基

                  

质粒DNA的转染优化 

可通过改变细胞密度、DNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。转染试剂 (µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。转染大于48h后,可通过适量添加培养基的方式延长转染时间。

 

           不同培养所需转染试剂和DNA的用量

培养

细胞数量

接种培养基

Opti-MEM稀释后终体积

DNA转染

试剂用量

DNA

50mL

0.5×106/mL

10mL

50µL

10µL

5µg

100mL

0.5×106/mL

20mL

100µL

20µL

10µg

250mL

0.5×106/mL

50mL

200µL

50µL

25µg

500mL

0.5×106/mL

100mL

400µL

100µL

50µg

1L

0.5×106/mL

200mL

2mL

200µL

100µg

5L

0.5×106/mL

1L

4mL

1mL

500µg

 

 

运输保存  

常温运输,2-8℃可保存一年。

 

注意事项 

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。